1. 培育箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就能够拉!留意周围环境的清洗就不会那么简单污染的拉!
2. 我的经验是在弥补水时**佳把水加热一下,到达培育箱的温度。
3. 这么早就养细胞了,咱们这里通常是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1份额熏一遍。留意要是熏的话千万留意混合以后马上脱离,然后密闭细胞培育室,滋味很影响的。**佳在养细胞前消毒,否则,的确没地方放细胞。
4. 咱们的办法比较简单,先用75%酒精擦洗内壁,通风10分钟,紫外线照耀30分钟即可。
5. 咱们的通常处理是先用75%的酒精擦洗内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个黑夜,然后通风一整天(一同翻开紫外线照耀)。
6. 咱们是把培育箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,作用极好,别的的请高手指导。
7. 熏蒸后吹**是肯定不行的,**起码要一个星期才能够让甲醛散尽,要不细胞长欠好的
8. 有的培育箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功用。惯例应当每周用酒精擦洗内部一次。详细的操作请参阅培育箱的手册,或着咨询培育箱技术支持。运用消毒剂应当心,培育箱内有检查温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有也许损坏某些器件,请慎用。别的,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆。假如在培育箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦(我实验室的真实故事)。总归,先看培育箱手册,再联络技术支持,方可万无一失啊。9. 惯例**佳啥也不放!硫酸铜的作用是按捺细菌成长(但大都用在处理污染的孔板)。由于如今的孵箱都有抑菌功用。
10. 咱们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内参加适当的灭菌双蒸水或许生理盐水.再加少数新洁尔灭,浓度不要紧.细胞养的都能够.
11. 我主张
1 **佳先把培育箱完全消毒.详细办法也是用75%的酒精好好清洗培育箱. 2,操作时严厉依照无菌操作的准则
3 我认为双抗的替换疑问却是不大,除非你正在运用的是污染的抗生素. 4 尽量减少观看细胞的次数及时刻.
12. 咱们实验室清洗培育箱的办法:用洗衣粉或洗洁精洗一遍——清水冲净——84消毒液洗——清水冲净——75%酒精擦洗一遍
13. 这是咱们实验室惯例的培育箱消毒办法(通常一个月一次),期望对你会有用
14. shou要把培育箱里的东西悉数取出,放尽培育箱里的三蒸水;重复用三蒸水冲刷培育箱,然后用75%酒精擦3遍,以后再用三蒸水擦3遍;培育箱里的架子先用自来水重复冲刷,然后用蒸馏水、三蒸水、75%酒精各擦3次,于紫外下照耀消毒1 h左右;**终将三蒸水(里边应加少数染料)参加培育箱,将消毒好的架子放入即
15. 培育箱应放置无菌室,水中应加适当的叠氮钠(防腐)或许硫酸铜,留意空气消毒.
16. 消毒培育箱的常用办法有两种:
把细胞移出,记住拧紧瓶盖,通常放在超净台内,室温一两个小时,疑问不大。如培育室有空调,也可将空调翻开。然后先用75%酒精棉球擦洗培育箱内壁,留意不要漏掉任何一个旮旯。擦洗两遍后用一蒸水或二蒸水清洗内壁,可多清洗几遍。**终用消过毒的棉球或75%酒精棉球把内壁再擦洗一遍即可。悉数操作没有必要在无菌条件下。**终可在培育箱的水里加上亚甲基蓝,混匀即可。亚甲基蓝溶液可起到必定的抑菌灭菌作用。待培育箱内酒精简直挥发完时,将细胞放入培育箱中。
还有一种办法即是直接用蒸馏水清洗完,然后再用紫外灯照(**佳是那种培育箱里就带有紫外灯的,就便利多了。)
通常培育箱是需求定时清洗的,咱们室是1-2月清洗一次,当然这要依据细胞养的多少和培育箱运用的频频程度来决议的。
17. 咱们实验室液发作过相似事情,我把咱们处理进程通知你,期望对你有协助:
shou要消毒培育箱,假如你们有两个或以上培育箱就好办了,假如只要一个且还有许多别的细胞就费事点。只能暂时的放在超净台上。详细如下,正午将空调温度打到**高(也只要31度),超净台开紫外。下午早点来关紫外,将细胞培育瓶盖盖紧,转到超净台内,用75%酒精擦洗培育箱,再用无臭氧型可移动的紫外等照耀半小时,然后将细胞放回,松开盖口即可(切记CO2瓶子阀门要关紧啊,否则气全跑光了)。
通常实验室长了霉菌的话,肯定要悉数消毒。
再消毒实验室,先把室内空谐和消毒柜过滤网都拆下清洗,在锥形瓶内加点高锰酸钾,放在实验室地上,然后倒入甲醛,立马关门走人就能够了。
2天后再开门装好东西,和往常相同开始工作了。由于2天不能干事,自己细胞要先方案好,大家都能够歇息两天。
18. 咱们实验室是将细胞悉数取出,酒精擦洗培育相,然后用紫外线照耀4小时以上,污染细胞悉数丢掉。还有即是培育室也选用紫外线消毒
19. 我也碰过这个状况,是自个的基础培育基污染了,光镜下面能够看见瓶底有细细的黑色小颗粒,但详细因素不详。处理办法: 1、被污染的细胞悉数照过紫外线2小时以上后丢掉; #p#分页标题#e#
2、同一批的培育基、运用的细胞清洗液等等悉数从头滤过消毒(有点舍不得悉数丢掉,就尝试了一下,成果证实是能够的);
3、翻开培育箱,用75%酒精擦洗,然后用新洁尔灭擦洗(此过程咱们重复了2次,隔天),用紫外照耀4小时以上;4、打扫培育室,紫外照4小时以上,重复一次;
后来就没有啦。:)假如污染严重的话,那就要重复重复再重复了。
20. 偶也在年前遇到两次大迸发,先是真菌后是细菌。搞得我对细胞培育都快失掉决心了,我养细胞都一年半了,往常细胞没啥,感受养细胞是很简单的事,但是当污染大迸发时真的有招架不住的感受。记住其时丢掉了简直悉数的细胞,近一百瓶,就只剩余保种的三两瓶,寒!!!**于处理办法,也即是乳酸熏蒸(记住把培育箱及超净台翻开)以后一星期关门关窗,不再进培育室,一星期后75%酒精做完全灭菌,也即是用酒精搽培育箱及培育室里的悉数平面,乃**包含地上。到如今有四个月了,偶的细胞一向极好。主张不要慌张,所谓兵来将挡,水来土掩。呵呵呵,悉数会好起来的。
21. 看来你要大动干戈了。shou要思考培育基的疑问。能够独自放置一瓶培育基到别的的培育箱里培育24小时看看是不是培育基污染。不过主张仍是悉数丢掉从头配置比较好。其次思考培育箱和培育室的疑问。根本上应当每一个月将培育箱完全消毒一次的。shou要用75%酒精擦洗,通常的培育箱都是能够拆开的,将能拆开的有些拆开擦洗后放到烤箱里烘烤(180度5个小时)。剩余的培育箱里用戊二醛擦洗后用紫外灯重复照耀。然后在要用培育箱培育室之前再用紫外灯照耀消毒2小时。你的相片里显现的应当是细菌污染,咳比较好抵挡。
22. 设置5%,却显现5.1%(当然这点差距真实不算太大,**于显现HIGH CO2,那是能够自个设定的,你能够自个设定二氧化碳浓度到达多少时报警(也即显现HIGH CO2,一同也许发出警鸣音,假如你没有按MUTE按钮或平等设置),同样地,你能够设置下限,还有温度的上下限),培育箱温度添加时CO2浓度会添加,反之亦然。检查一下你的CO2减压阀上面显现的压力指示是不是超越0.08MPa,长时间过高的CO2压力简单损坏培育箱内CO2压力调理模块,那样需求许多银子修理的。假如状况进一步恶化,主张联络售后服务。
23. 手提式紫外灯
24. 1)一个大准则是:细菌和细胞系统是完全不一样的,jue不能够放在一同,通常实验室均设置细菌间、细胞间,严厉的分隔是成功培育细胞的确保。2)关于CO2培育箱的清洗工作,应当说不难。由于为不锈钢材,你用0.1%新洁尔灭擦洗洁净后,在用2%的CuSO4清洗(清霉菌,在CO2条件下霉菌很易生/),**佳用70%乙醇喷雾消毒箱内空气。再凉干后,再底部再加2%CuSO4(水稍出现兰色即可)的灭菌水进行安稳培育箱,待培育箱温度和湿度安稳后,再用一瓶细胞预实验一下,培育2-3天,没有疑问再进行培育。
25. 有的培育箱能够直接高温干烤灭菌的,或许有的金属架能够干烤
26. 底部水盘参加蒸馏水后见到一片一片的东西,很也许是细菌群落的成长!自己经验是,必须清洗,并且是完全清洗洁净!拆开支架和每层的托盘,包含水盘(留意拆开**佳先向技术员了解内部结构,以防误拆损坏),用碘伏棉球将培育箱里里外外和拆出来的部件拭擦2次,然后再用酒精将残留碘伏拭去。下一步是,翻开培育箱的门,开紫外照耀过夜,这么就可放心了。我刚回来即是如此弄的,培育的细胞并没有感染痕迹,生机甚佳,供参阅!祝你好运!
27. 我运用的办法是:
1 取下培育箱内的隔板及挂钩,用清水清洗洁净后,75%酒精完全擦洗消毒,然后120度烤箱,考1小时。
2,培育箱用清水擦洗洁净后用75%酒精完全擦洗消毒 3,带无菌手套,安装好培育箱内的隔板及挂钩 4,翻开培育箱紫外灯照耀30分钟 5,高压蒸馏水后参加
咱们一向即是这么做的,作用极好,能够试试看啊。
28. 弥补一个水盘消毒的法子∶清水清洗洁净,75%酒精完全擦洗消毒后,多弄些酒精上去,点火烧一下.作用杠杠的!!
29. 把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内参加适当的灭菌双蒸水或许生理盐水.再加少数新洁尔灭,浓度不要紧
30. 水套式,气套式二氧化碳培育箱。
31. 细胞成长的环境请求有必定湿度,必须加水!我的小经验是: 1、双蒸水装在5L瓶中,2、高温灭菌,3、移进细胞培育实验室,在紫外照耀下冷却,4、6小时后,在参加培育箱中运用。
假如发现托盘中的说有白色漂浮物存在是,尽量吸干!(此物思考是霉菌污染); 还有假如有条件,即是定时75%酒精大清洗!我通常2个月清洗一次!(包含细胞培育实验室)
这么在无菌操作下,根本确保你革除污染!!
32. 培育箱内不加水是不规范的,由于细胞成长的环境请求有必定湿度。 咱们培育细胞不只经常坚持有水,并且培育液中不加任何抗生素。只要无菌操作过关,不会发作细菌污染。
33. 咱们实验室往常培育箱的消毒办法:(清洗前**佳开紫外30分钟) 1、隔板的清洗:先将隔板卸下,用洁净纱布沾新洁而灭擦两遍; 2、箱内壁用新洁而灭擦洗后再喷75%酒精,关门熏蒸15分钟; #p#分页标题#e#
3、盛蒸馏水的盘子:把盘里的水倒掉,用新洁而灭擦洗,干后倒入三蒸水; 4、装好板后,再喷75%酒精关门熏蒸30分钟。 5、培育室开紫外照30分钟以上。
34. 咱们实验室是将悉数隔板卸下,新洁而灭擦洗,放在超净工作台内紫外灭菌,CO2孵箱内用紫外灯照耀12h以上。
35. 引荐办法:拆开隔板,新洁儿灭搽3次,然后酒精搽3次,紫外下面照2小时,然后装上隔板,箱壁同样处理,翻开箱子,用小紫外灯或房间紫外灯照2小时。留意要搽顶部的螺旋桨。装好后,喷酒精即可。别的,仍是用用硫酸铜比较好,饱和溶液放置在箱子底部。屡试屡爽,大概能够管3-4个月没有疑问。如有用,请斑竹加分,谢谢!
36. 加硫酸铜的意图是为了避免真菌的成长,但硫酸铜简单改动孵箱pH值,所以主张不加硫酸铜,直接加蒸馏水即可,坚持孵箱湿度.
37. 前一段时刻培育箱里老是有散在的细胞霉菌污染。培育箱高温消毒后,如今翻开,发现里边那扇玻璃门和垫圈会有许多水汽,培育瓶外壁也有。请问是怎么回事?细胞还能养吗?是由于培育箱门的加热毛病或设置过错,致使门的温度与箱内温度不相同,所以引起玻璃门结水汽。对细胞培育没多大的影响,由于箱内的温度是正常的。
38. 这种状况很常见,能够用以下办法处理:往水盘里的水参加适当的硫酸铜,拌和均匀即可,由于硫酸铜是重金属盐,能够到达灭菌作用;别的也能够加10%的新吉尔灭等无影响性的消毒物质。留意,千万不能直接往水盘里加自来水,由于自来水里有许多潜在的霉菌等,一旦条件温和它们就会迅速繁殖,**佳是用煮开的蒸馏水。留意了这些细节,疑问就方便的解决了